DNA提取試劑盒是如何從動(dòng)物組織中提取基因組DNA的

 
　　DNA提取試劑盒是根據(jù)氯化芐法構(gòu)建的，能夠從樣本中提取基因組DNA的試劑盒。氯芐具有能將含有纖維素等的細(xì)胞壁中的羥基芐基化，從而破壞細(xì)胞壁的特性。本制品利用了氯芐的這一特性，將植物樣品凍結(jié)融解后，再使用PipetTip的端將植物樣品在Microtube壁上數(shù)次按壓即可破壞細(xì)胞壁。本法與傳統(tǒng)方法相比，省去了液氮研磨等煩瑣步驟，有利于一次性處理大量樣品。而且，本制品經(jīng)過(guò)了改良，熱處理時(shí)間只需15分鐘，使用本制品從實(shí)驗(yàn)開(kāi)始至水相回收只需30分鐘時(shí)間。得到的基因組DNA可以進(jìn)行PCR擴(kuò)增及限制酶處理等。
　　DNA提取試劑盒如何從動(dòng)物組織中提取基因組DNA：
　　使用研缽進(jìn)行勻漿時(shí):
　?、偃?~100mg的動(dòng)物組織或人組織移入冰浴預(yù)冷的研缽中，快速用力展研成勻漿。
　　注)下列組織請(qǐng)加液氮研磨至粉末狀。
　　A.富含DNA酶的胰臟、脾臟、胸腺、淋巴等組織。
　　B.富含膠原蛋白的皮膚、肌腱等組織。
　　C.富含角質(zhì)蛋白的組織或堅(jiān)硬的組織(如骨骼)等。
　?、诩尤?50μl的SolutionA和0.9μl的RNaseA1，溫和研磨30秒鐘。
　　注)使用上述①-注)的實(shí)驗(yàn)材料時(shí)，請(qǐng)?jiān)诩尤隨olutionA及RNaseA1后，將研缽置于65℃水浴上研磨1分鐘。
　?、凼占?50μl研磨好的組織勻漿液移至CollectionTube中。如果勻漿體積不足650μl，請(qǐng)補(bǔ)充SolutionA至650μl，65℃保溫5分鐘。
　　使用研磨棒進(jìn)行勻漿時(shí):
　?、偃?~100mg的動(dòng)物組織或人組織移入冰浴預(yù)冷的CollectionTube中，用研磨棒快速研磨成糊狀。
　?、诩尤?50μl的SolutionA和0.9μl的RNaseA1后用研磨棒快速研磨成勻漿。
　　③加入350μl的SolutionA將研磨棒上的勻漿沖入CollectionTube中，充分振蕩混合后，65℃保溫5分鐘。